产品背景介绍

酶免疫分析(EIA)技术，被广泛应用于抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP) 是酶联免疫分析技术中最常用的一种酶。因3, 3', 5, 5'-四甲基联苯胺 (TMB) 在HRP的显色反应体系中比其它色原具有更高的灵敏度且无至癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验 (ELISA)，免疫印迹或者免疫组化以及氯和过氧化氫的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品研发与生产以及科研需求，我们专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。

产品特点

·       稳定性好：+2-8°C保存，有效期不低于36个月； 显色终止后读数稳定

·       背景低

·       质量可靠：产品批间差小

·       外观：本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色

产品种类及应用

根据TMB显色液中的成份组成，可分单组份和双组份；根据TMB反应产物的物理状态，又可分为可溶型和沉淀型。可溶型TMB显色液用于酶联免疫吸附实验 (ELISA)，而沉淀型TMB显色液用于免疫印迹，有以下几种产品：

单组份-可溶型

双组份-可溶型

使用方法 (可溶型)

·       温度平衡：在用前至少半小时将TMB 从+2-8°C冰箱中取出，待达到室温后即可使用。

·       加液：加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3-5次，每孔加TMB显色液100ul （双组份A、B液按1：1体积比用前混合， 或先后各加50µl）。 根据个人实验需要，在室温(15-25°C)或37°C下温育10-15分钟。

·       终止：加等体积的TMB反应终止液，孔中反应液由蓝色变为黄色。

·       读数：终止反应后10分钟内在450nm处读数 （通常以620-630nm作为参考波长）。

·       注意：如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP偶联物。

单组份-沉淀型

双组份-沉淀型

使用方法 (沉淀型)

·       温度平衡：在用前至少半小时将TMB 从+2-8°C冰箱中取出，待达到室温后即可使用。

·       加液：加完HRP结合物并温育一定时间后，洗膜3-5次，根据需要加一定量的TMB显色液（双组份A、B液按1：1体积比用前混合）。 根据个人实验需要，在室温(15-25°C)或37°C下温育10-15分钟， 或达到最佳信噪比。

·       终止：将 TMB显色液倒掉，用纯水洗2-3遍。

·       结果判读：肉眼判读， 或仪器扫描。

·       注意：如果出现高的反应背景，表明TMB底物反应过于强烈。建议进一步稀释一抗和/或HRP偶联物。

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