在ELISA测试中,由于酶和底物的反应在一定时间内一直进行,这样会影响实验结果数值,因此需要在特定时间内停止酶和底物的反应。这需要特定的终止液来完成。
TMB终止液有两种类型的用于ELISA的TMB显色终止液:450nm和620nm终止液。
450nm终止液是一种酸性溶液。TMB在氧化酶的作用下被氧化成可溶性的蓝色终产物(吸峰值在620nm左右),该产物在终止液的作用下变为可溶性的黄色产物(吸峰值在450nm)。此类终止反应可将吸光值提高2-4倍,亦即可将ELISA的敏感性提高2-4倍。620nm终止液被用来终止TMB与氧化酶的反应时,TMB的蓝色终产物的颜色不改变,并且吸峰值仍在620nm左右。
目前,英创生物生产3种酸性终止液和1种620nm终止液。
产品名
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产品编号
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类型
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特点
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TMB 终止液I
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STP-001
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即用型
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为普通终止液。TMB反应终止后,应尽快读取结果。否则黄色终产物有可能形成黑色沉淀,影响结果读数。
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TMB 终止液II
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STP-002
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即用型
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与1号相比,该终止液可防止黄色终产物形成黑色沉淀。
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TMB 终止液III
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STP-003
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即用型
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除了可防止黄色终产物形成黑色沉淀外,还能使吸光值在2小时内保持不变。
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TMB 终止液IV
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STP-004
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即用型
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TMB的蓝色终产物的颜色不改变,并且吸峰值仍在620nm左右。
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pNPP终止液是一种碱性溶液。pNPP在磷酸酶的作用下形成可溶性的黄色终产物(吸峰值在405nm)。当加入pNPP终止液后,该黄色终产物的颜色保持不变,在405nm光谱下读数。英创生物只生产1种pNPP终止液,亦为即用型。
产品名
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产品编号
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类型
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特点
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pNPP终止液I
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STP-pNPP-001
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即用型
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能使吸光值保持不变。
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